《007首部曲：皇家夜總會》描述詹姆斯龐德〈丹尼爾克雷格 飾〉成為英國特務之前的故事。 雖然初出茅廬，但是龐德已具備高超的情報員能力，在連續完成兩項稱職的刺殺行動之後，他也晉升為 “00” 情報員的地位。

龐德成為第七號情報員的第一趟任務來到了馬達加斯加島，負責監視恐怖份子默拉卡的活動。 然而一切情況不如預期計劃般順利，因此龐德決定不聽從 MI6 的指示而獨自進行調查，以便找出恐怖份子其餘的巢穴。 龐德循線追蹤到巴哈馬，並在那裡遇到迪米特歐斯和老婆索蘭奇。 龐德發現迪米特歐斯與涉及世界恐怖組織的銀行家契夫軻有所牽連。

而英國機密部門的情報顯示，契夫軻因為要參加在蒙特尼哥羅的皇家夜總會所舉行的高籌碼撲克大賽而正在積極籌款。 MI6 指派 007 與契夫軻進行撲克比賽，因為假使契夫軻未能獲勝，他的組織將因此而瓦解。

M夫人要求龐德特別留意美艷而迷人的薇斯朋琳德〈伊娃葛林 飾〉。 起初龐德不認為薇斯朋能夠提供什麼有用的情報，但是隨著他們共同經歷許多危險，甚至遭受契夫軻的嚴刑拷問之後，龐德對於薇斯朋的好感也日益加深。在芒特尼格羅，龐德與 MI6 當地的情報員馬提斯和代表美國中央情報局利益的菲利斯萊特攜手合作。 在馬拉松式漫長的賭局競爭中，卑劣手段與暴力行為亦將層出不窮，持續升高的賭注中暗藏邪惡的金錢遊戲，將本片帶入令人驚悚無比的高潮。